NY_T 1663-2008 乳与乳制品中B-乳球蛋白的测定 聚丙烯酰胺凝胶电泳法
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ID： |
06075C4200204B03B1E234D61DFE63C2 |
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文件大小(MB)： |
0.38 |
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7 |
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日期： |
2024-8-13 |
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ICS 67.120.01,B45 NY,中华人民共和国农业行业标准,NY/T 1663—2008,乳与乳制品中。ー乳球蛋白的测定,聚丙烯酰胺凝胶电泳法,Determination of /3-lactoglobulin content in milk and dairy products,SDS-PAGE electrophoresis,2008-0774 发布2008-0870 实施,中华人民共和国农业部发布,NY/T 1663—2008,刖 a,本标准中附录A为资料性附录,本标准由中华人民共和国农业部畜牧业司提出,本标准由全国畜牧业标准化技术委员会归口,本标准起草单位:农业部食品质量监督检验测试中心（上海）,本标准主要起草人:孟瑾、黄菲菲、韩奕奕、吴榕、陈美莲、何亚斌、王建军、韩惠雯,I,NY/T 1663—2008,乳与乳制品中ター乳球蛋白的测定,聚丙烯酰胺凝胶电泳法,范围,本标准规定了乳与乳制品中所乳球蛋白的SDS- PAGE凝胶电泳测定方法,本标准适用于乳与乳制品(生牛乳、奶粉、液态乳、奶酪、乳清粉)中Bー乳球蛋白的测定,本标准液态样品的检出限24 mg/ 100 mL,固液态和固体样品的检出限240 mg/100 g,2规范性引用文件,下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件,其随后所有,的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准,然而,鼓励根据本标准达成协议的各方研究,是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本标准,GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法,3原理,试样用SDS - PAGE凝胶电泳后,用光密度计对B ー乳球蛋白进行测定分析,求得B ー乳球蛋白的含,量,4试剂,除非另有说明,在分析中仅使用确认为分析纯的试剂;实验用水应符合GB/T 6682中一级水的规,定,4. I 冰醋酸(CH3coOH),4.2 磷酸(H3Poハ,4.3 硫酸镂｛(NHMSOJ,4.4 过硫酸核｛(NHQzSzCU,4. 5 甲醇(CH30H),4.6 乙醇(C2 HQH),4.7 丙三醇(C3 H8 03),4.8 甘氨酸(C2H5NO2),4. 9三羟甲基氨基甲烷(QHuN03):生化级,4. 10 §一統基乙醇(C2 H60S):生化级,4. 11丙烯酰胺(C3H5NO),4. 12 N-N'一甲叉双丙烯酰胺(C'HKQ?)：生化级,4. 13十二烷基磺酸钠2 H25 so3 Na):生化级,4. 14 N,N,N',N'一四甲基乙二胺CHkNz):生化级,4. 15 澳酚蓝(CigHioBrQS),4. 16考马斯亮蓝R-250,1,NY/T 1663—2008,4. 17盐酸溶液,4 mol/L,量取36 mし浓盐酸(HC1)注入50 mL水中,定容至100 mL,混匀,4. 18丙烯酰胺单体贮备液,准确称取14. 55 g丙烯酰胺(4. 11)、〇. 45 g N-N'一甲叉双丙烯酰胺(4. 12),先用40 mL水溶解,搅,拌,直至溶液变澄清透明,再用水稀释至50 mL,过滤,备用。该贮备液在4℃下棕色瓶中可保存一个月,注:丙烯酰胺单体都是中枢神经毒物,小心操作,4. 19浓缩胶缓冲液贮备液,1 mol/L,pH6.8,准确称取6. 06 g三羟甲基氨基甲烷(4. 9),溶解于40 mL水中,用盐酸溶液(4. 17)调节pH至6. 8,后,用水定容至50 mL,4℃下保存,4.20 分离胶缓冲液贮备液,1.5 mol/L,pH 8. 8,准确称取9. 08 g三羟甲基氨基甲烷(4. 9),溶解于40 mL水中,用盐酸溶液(4. 17)调节pH至8. 8,后,用水定容至50 mL,4℃保存,4.21 过硫酸镀溶液,100 g/L,准确称取0. 1 g过硫酸钱(4. 4),加1 mL水溶解,使用前配制,4.22 十二烷基磺酸钠溶液,100 g/L,准确称取5 g十二烷基磺酸钠(4. 13),用水溶解定容至50 mL,室温保存,4.23 N,N,N',N'一四甲基乙二胺溶液,体积分数为10%,量取0. 10 mL N,N,N',N'一四甲基乙二胺(4. 14),加水稀释定容至1.00 mL,4.24 样品缓冲液,0. 08mol/L,精确称取4 1ng澳酚蓝(4. 15),溶解于5.00 mL水中,分别量取1.60 mL浓缩胶缓冲液贮备液,(4. 19),4. 〇〇 mL十二烷基磺酸钠溶液(4. 22),1. 20 mL 0-疏基乙醇(4. 10) ,2. 20 mL丙三醇(4. 7),全,部混合后用水稀释定容至20 mL,41保存,4.25 电极缓冲液,pH 8. 3,分别准确称取3. 0 g三羟甲基氨基甲烷(4. 9),14. 4 g甘氨酸(4. 8),加入十二烷基磺酸钠溶液,(4. 22)10 mL,调节 pH 至 8. 3,定容至 1 000 mし,4.26 考马斯亮蓝染色液,2. 5 g/L,称取0. 25 g考马斯亮蓝R- 250(4. 16)和!0 g硫酸钱(4. 3)，分别加入20 mL乙醇(4. 6),10 mL磷,酸(4. 2),溶解混匀,用水定容至100 mL,4.27 脱色液,分别量取75 mL冰醋酸(4. 1),50 mL甲醇(4. 5),875 mL水,混匀,4.28 がー乳球蛋白标准溶液,1.00 mg/mL,精确称取0. 010 0 g斫乳球蛋白标准品(纯度フ90%),用样品缓冲液(4. 24)定容至10 mL,沸水浴,中加热3 min~5 min,在ー2……
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